Optimized broad-range real-time PCR-based method for bacterial screening of platelet concentrates / Otimização de um método baseado em PCR em tempo real para rastreamento de bactérias em concentrados de plaquetas

Abstract Bacterial contamination of blood components remains a major challenge in transfusion medicine, particularly, platelet concentrates (PCs) due to the storage conditions that support bacterial proliferation. In this study, we develop a rapid, sensitive and specific real-time PCR protocol for bacterial screening of PCs. An internally controlled real-time PCR-based method was optimized and validated with our proprietary 16S Universal PCR Master Mix (IBMP/Fiocruz), which targets a conserved region of the bacterial 16S rRNA gene. Nonspecific background DNA was completely eliminated by treating the PCR Master Mix with ethidium monoazide (EMA). A lower limit of detection was observed for 10 genome equivalents with an observed Ct value of 34±1.07 in calibration curve generated with 10-fold serial dilutions of E. coli DNA. The turnaround time for processing, including microbial DNA purification, was approximately 4 hours. The developed method showed a high sensitivity with no non-specific amplification and a lower time-to-detection than traditional microbiological methods, demonstrating it to be an efficient means of screening pre-transfusion PCs.

Resumo A contaminação bacteriana dos componentes sanguíneos é um grande desafio na medicina transfusional, principalmente nos concentrados de plaquetas (PCs) devido às condições de armazenamento que favorecem a proliferação bacteriana. Neste estudo, desenvolvemos um protocolo de PCR em tempo real rápido, sensível e específico para a triagem bacteriana de PCs. Um método baseado em PCR em tempo real, controlado internamente, foi otimizado e validado com um Master Mix Universal PCR 16S (IBMP / Fiocruz), que detecta uma região conservada do gene 16S rRNA bacteriano. O background de DNA não específico foi completamente eliminado tratando a PCR Master Mix com monoazida de etídio (EMA). O limite de detecção inferior observado foi de 10 cópias equivalentes do genoma com um valor de Ct 34 ± 1,07, a curva de calibração foi gerada com diluições seriada de 10 vezes do DNA de E. coli. O tempo de processamento, incluindo a purificação microbiana do DNA, foi de aproximadamente 4 horas. O método desenvolvido mostrou alta sensibilidade sem amplificação inespecífica e menor tempo de detecção do que os métodos microbiológicos tradicionais, demonstrando ser um meio eficiente de triagem de PCs pré-transfusionais.

Contaminação microbiana em colírios de pacientes em tratamento de glaucoma / Microbial contamination in eye drops of patients in glaucoma treatment

Resumo Objetivos: Avaliar o grau de contaminação por fungos e bactérias e o modo de conservação destes colírios hipotensores por parte dos pacientes no ambulatório de Glaucoma da Santa Casa de Ribeirão Preto. Métodos: Foram selecionados aleatoriamente cinquenta e cinco pacientes, em seguimento no ambulatório, e após consentimento dos mesmos os colírios eram coletados e enviados via correio para análise por microbiologista e patologista em até 72 horas. Foi analisado 0,5ml aproximadamente das medicações e os pacientes respondiam a um questionário simples sobre o método de conservação e se consideravam estes adequados. Resultados: Dos 55 colírios analisados, cinco (9,01%) estavam com seu conteúdo líquido contaminado. Entre os microrganismos isolados haviam 4 bactérias Gram negativas, sendo 1 (1,8%) por Serratia marcescens, 1 (1,8%) Pseudomonas aeruginosa e 2 (3,6%) Stenotrophomas maltophilia. Um colírio estava contaminado pelo fungo Cândida ssp Todos pacientes do estudo julgam seus métodos de armazenamento e instilação adequados. Os pacientes que tiveram os colírios positivados eram convocados para exame clínico e passavam por novo questionário pelo investigador. Conclusão: O tempo de abertura dos frascos e os métodos de conservação influenciam na contaminação dos medicamentos, todos os colírios com crescimento de microrganismos no presente estudo estavam abertos entre 30 e 90 dias. O fato de que a maioria dos pacientes levam seus colírios em tarefas cotidianas, aumenta a exposição dos frascos e podem ser um fator relevante para determinar a contaminação destas medicações.

Abstract Objetives: To assess the degree of fungal and bacterial contamination of hypotensive eye drops and the way these are preserved by the patients at the Glaucoma outpatient clinic of Santa Casa Hospital in Ribeirão Preto. Methods: Fifty-five patients were randomly assigned to follow-up in the outpatient clinic and, after their consent, an eye drop was collected per patient and later sent by mail for analysis by microbiologist and pathologist in up to 72 hours. Approximately 0.5ml of the medications were analyzed and the patients were asked to answer a simple questionnaire on the method of drug conservation and whether they considered it adequate. Results: Of the 55 analysed eye drops, five (9.01%) had their liquid contents contaminated. Among the microorganisms isolated there were 4 Gram negative bacteria, 1 (1.8%) by Serratia marcenses, 1 (1.8%) Pseudomonas aeruginosa and 2 (3.6%) Stenotrophomas maltophilia. An eye drop was contaminated by the fungus Candida ssp. All the patients in the study judged their methods of storage and instillation appropriate. The patients who had the positive coliria were summoned for clinical examination and passed through a new questionnaire by the investigator. Conclusion: The time and methods of preservation influence the contamination of medicinal products. All the eye drops that presented growth of microorganisms in the present study were open between 30 and 90 days. The fact that most patients take their eye drops on daily tasks increases the exposure of the bottles and can be a relevant fact to determine the contamination of these medications.

Biofilm formation by Vibrio parahaemolyticus on different surfaces and its resistance to sodium hypochlorite / Formação de biofilme por Vibrio parahaemolyticus em diferentes superficies e resistência ao hipoclorito de sódio

ABSTRACT: Vibrio parahaemolyticus is an important pathogen for both fish industry and consumers. It forms biofilm which makes it difficult to eliminate this microorganism using sanitizers. This study aimed to assess biofilm formation on different surfaces and effect of biofilm on resistance to sanitizers. Eight isolates of biofilm-forming V. parahaemolyticus were tested for the ability to form biofilms on a number of surfaces including high density polyethylene, stainless steel, glass, exoskeleton of Farfantepenaeus paulensis (Pink Shrimp), and operculum of Micropogonias furnieri (Whitemouth Croaker). Efficiency of sanitizer sodium hypochlorite against the bacteria was evaluated in the biofilms formed on the surface of the materials used; out the eight strains analyzed four formed biofilm on different surfaces. The present study shows that there are variations between surfaces in terms of biofilm formation, with more than one bacterial strain being able to form biofilm on the surface of the operculum of M. furnieri and on high density polyethylene as well. One isolate formed biofilm on glass, and one isolate formed biofilm on stainless steel. Sanitizers reduced biofilm formation on all surfaces. Based on our findings, we concluded that V. parahaemolyticus isolates have different ability to form biofilm on different surfaces. No isolates formed biofilm on shrimp shells. Results of this study also showed that sodium hypochlorite eat a concentration of 20 parts per million (20ppm) of Cl2, albeit not able to eliminate bacteria reported in biofilms, is still capable of reducing bacterial populations.

RESUMO: Vibrio parahaemolyticus é uma bactéria patogênica importante tanto para a indústria como para os consumidores de pescados, uma vez que pode formar biofilme, dificultando a sua eliminação por sanitizantes. Este estudo teve como objetivo verificar a formação de biofilme em diferentes superfícies e o efeito do biofilme sobre a resistência a sanitizante. Oito isolados de V. parahaemolyticus formadores de biofilme foram testados quanto à capacidade de formar biofilme em superfícies de polietileno de alta densidade, aço inoxidável, vidro, exoesqueleto de Farfantepenaeus paulensis (Camarão-rosa) e opérculo de Micropogonias furnieri (Corvina). A eficiência do sanitizante hipoclorito de sódio foi avaliada frente às bactérias nos biofilmes formados sobre a superfície dos materiais utilizados. Das oito cepas analisadas, quatro foram consideradas formadoras de biofilme em diferentes superfícies. Os resultados mostraram variação entre as superfícies, sendo que mais de uma cepa formou biofilme na superfície do opérculo de M. furnieri e do polietileno de alta densidade. Um isolado formou biofilme em vidro e um em aço inoxidável. Nenhum isolado formou biofilme na carapaça de camarão. O sanitizante reduziu a formação do biofilme em todas as superfícies. Conclui-se que os isolados de V. parahaemolyticus apresentam distinta capacidade de formar biofilme em diferentes superfícies e que o hipoclorito de sódio na concentração de 20 partes por milhão (20ppm) de Cl2, embora não elimine as bactérias que se encontram em biofilme, reduz a sua população.

Skin antisepsis protocols for the collection of blood from donor dogs / Protocolos de antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate and compare the bactericidal efficacy of2% chlorhexidine surfactant solution + 70% alcohol and 2% chlorhexidine surfactant solution + 0.5% chlorhexidine-alcohol, and standardize skin antisepsis for blood collection from donor dogs. One hundred and twenty skin swabsof the jugular regions of 20 dogs were evaluated. Swabs were distributed into six treatment(T) groups according to the disinfectant used and removal or retention of local hair: T1involved neither antisepsisnorhair removal; T2comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcoholwithout hair removal;T3 comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol without hair removal; T4comprised hair removal but no antisepsis;T5comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcohol withhair removal; and T6comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol with hair removal. Antiseptic agents were continuously applied in a single direction for a total of 3 min. Use of antiseptics was effective with or without hair removal, resulting in the absence of bacterial growth. Complete efficacy of the technique used in this study may have been due to the increased antiseptic application time. In conclusion,the antisepsis protocols tested in this study can be safely used for the collection of blood from dogs; although,removal of hair prior to antisepsis is still recommended.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar o potencial de redução bacteriana proporcionado peloclorexidinadegermante 2% + álcool 70% eclorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% e padronizar a antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores. Foram avaliados 120 zaragatoas de pele da região da jugular de 20 cães, que foram distribuídos em seis tratamentos (T) de acordo com oagente usado para desinfecção, associado, ou não, a tricotomia local: T1 - Tratamento sem tricotomia e sem antissepsia, T2 - Tratamento clorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% sem tricotomia, T3 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% sem tricotomia, T4 - Tratamento com tricotomia e sem antissepsia, T5 - Tratamento clorexidina 2% + clorexidina alcoólica 0,5% com tricotomia, T6 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% com tricotomia. A antissepsia foi feita de forma contínua em um único sentido, totalizando 3 minutos. O uso dos antissépticos se mostraram eficazes nos tratamentos com e sem tricotomia não apresentando crescimento bacteriano. A eficácia de 100% da técnica utilizada no presente trabalho pode ser decorrente do maior tempo de antissepsia. Conclui-se que os protocolos de antissepsia realizados neste estudo podem ser utilizados com segurança para a colheita de sangue de cães, embora ainda o recomendado seja a tricotomia antes da antissepsia.

Age influence on quality of shell and penetration in bacterial laying lightweight eggs / Influência da idade na qualidade da casca e na penetração bacteriana em ovos de poedeiras leves

This study evaluated the influence of the bird's age on the quality of the shell and percentage of bacterial penetration in commercial eggs. White-shelled commercial eggs were used, laid by light laying hens in their first laying cycle at 21, 39, 51, and 62 weeks of age. Shell quality evaluations comprised: egg weight, specific gravity, percentage and thickness of shell, number and size of pores. For evaluations regarding bacterial penetration, strains of several enterobacterias and one salmonella were used, all of which resistant to Nalidixic acid (100µg/ml). The method employed for evaluation of bacterial penetration was filling the eggs with growth medium. The data were subjected to variance analysis with 5% of probability using SAS (Education Analytical Software, 2013). Eveb though increase in the laying hen's age caused reduction of the quality of eggshells, it failed to affect the percentage of penetration of the bacterial samples evaluated.(AU)

O presente estudo avaliou a influência da idade da ave sobre a qualidade da casca e na porcentagem de penetração bacteriana em ovos comerciais. Foram utilizados ovos brancos comerciais provenientes de poedeiras leves em primeiro ciclo de postura com 21, 39, 51 e 62 semanas de idade. As avaliações de qualidade da casca realizadas foram: peso do ovo, gravidade específica, porcentagem e espessura da casca, número e tamanho dos poros. Para as avaliações da penetração bacteriana, foram utilizadas cepas de diversas enterobactérias e uma salmonela, sendo todas resistentes ao ácido nalidíxico (100µg/mL). O método utilizado para a avaliação da penetração bacteriana foi por meio do preenchimento dos ovos com meio de cultura. Os dados foram submetidos à análise de variância com 5% de probabilidade utilizando-se o programa SAS - Statistical Analisys System (Education Analytical Software, 2013). O aumento da idade da poedeira promoveu a redução da qualidade da casca dos ovos, porém não foi capaz de influenciar a porcentagem de penetração das amostras bacterianas avaliadas.(AU)

Optimized broad-range real-time PCR-based method for bacterial screening of platelet concentrates

Abstract Bacterial contamination of blood components remains a major challenge in transfusion medicine, particularly, platelet concentrates (PCs) due to the storage conditions that support bacterial proliferation. In this study, we develop a rapid, sensitive and specific real-time PCR protocol for bacterial screening of PCs. An internally controlled real-time PCR-based method was optimized and validated with our proprietary 16S Universal PCR Master Mix (IBMP/Fiocruz), which targets a conserved region of the bacterial 16S rRNA gene. Nonspecific background DNA was completely eliminated by treating the PCR Master Mix with ethidium monoazide (EMA). A lower limit of detection was observed for 10 genome equivalents with an observed Ct value of 34±1.07 in calibration curve generated with 10-fold serial dilutions of E. coli DNA. The turnaround time for processing, including microbial DNA purification, was approximately 4 hours. The developed method showed a high sensitivity with no non-specific amplification and a lower time-to-detection than traditional microbiological methods, demonstrating it to be an efficient means of screening pre-transfusion PCs.

Resumo A contaminação bacteriana dos componentes sanguíneos é um grande desafio na medicina transfusional, principalmente nos concentrados de plaquetas (PCs) devido às condições de armazenamento que favorecem a proliferação bacteriana. Neste estudo, desenvolvemos um protocolo de PCR em tempo real rápido, sensível e específico para a triagem bacteriana de PCs. Um método baseado em PCR em tempo real, controlado internamente, foi otimizado e validado com um Master Mix Universal PCR 16S (IBMP / Fiocruz), que detecta uma região conservada do gene 16S rRNA bacteriano. O background de DNA não específico foi completamente eliminado tratando a PCR Master Mix com monoazida de etídio (EMA). O limite de detecção inferior observado foi de 10 cópias equivalentes do genoma com um valor de Ct 34 ± 1,07, a curva de calibração foi gerada com diluições seriada de 10 vezes do DNA de E. coli. O tempo de processamento, incluindo a purificação microbiana do DNA, foi de aproximadamente 4 horas. O método desenvolvido mostrou alta sensibilidade sem amplificação inespecífica e menor tempo de detecção do que os métodos microbiológicos tradicionais, demonstrando ser um meio eficiente de triagem de PCs pré-transfusionais.

Innocuousness of sandwiches sold on the streets of Cuiaba, Mato Grosso state, Brazil / Inocuidade de sanduíches vendidos nas ruas de Cuiabá - MT, Brasil

Objective: This article discusses the problem involving the street food commerce and its sanitary conditions, aiming at the food safety as part of food security and promotion of human right to healthy eating. It was analyzed the effectiveness of an educational intervention on Good Manufacture Practices carried out with food street vendors. The sandwich, known as the "baguncinha", was sold in the city of Cuiaba/MT/Brazil, in 2005. Methods: It is a cross-sectional study with a test group case. Before the training intervention, 105 sandwiches were tested by standard methods regarding heat-stable coliform counts; identification of Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus; and incidence of Salmonella spp. One hundred eighty new samples were analyzed one and six months after the training program, totaling 285 sandwiches. Results: A total of 31.4% commercial premises were considered unsuitable for food consumption. The training program applied in this study does not seem to have altered the microbiological quality of sandwiches. Conclusions: This scenario can contribute to a high risk associated with foodborne illnesses. The results suggest the necessity of a review to identify approaches and methods that bring about effective changes in street food commerce. Interventions should be associated with actions for hygiene-awareness of the consumers. Furthermore, a debate on the importance of regulatory public policies is recommended.

Objetivo: O presente artigo contribui para a discussão sobre a questão da comercialização de comida de rua e a sua relação com a qualidade higiênico-sanitária, como parte da segurança alimentar e nutricional, na perspectiva da promoção do direito humano à alimentação adequada. Teve como objetivo analisar a eficácia de uma intervenção educativa sobre Boas Práticas de Manipulação, desenvolvida em 2005, como os comerciantes de sanduíches conhecidos como "baguncinha", vendidos nas ruas do município de Cuiabá. Método: Foi delineado como um estudo transversal do tipo grupo controle. Antes da qualificação, foram testados 105 sanduíches, para contagem de coliformes termotolerantes; identificação de Bacillus cereus, Clostridium perfringens e Staphylococcus aureus, e incidência de Salmonella spp. Foram analisadas 180 novas amostras um e seis meses após o treinamento, totalizando 285 sanduíches. Resultados: Um total de 31,4% dos estabelecimentos estava inadequado para o consumo de alimentos e o programa de treinamento aplicado na pesquisa parece não ter alterado a qualidade microbiológica do sanduíche. Conclusão: Este cenário pode contribuir para um elevado risco associado a doenças transmitidas por alimentos. Os resultados assinalam a necessidade de uma revisão para identificar abordagens e métodos que permitam mudanças efetivas no comércio de comida de rua. É aconselhável que as intervenções sejam associadas a ações de conscientização dos consumidores sobre a questão higiênico-sanitária. Além disso, é fundamental que provoquem o debate sobre a importância da regulamentação de políticas públicas específicas para este segmento comercial.

Ação da radiação ultravioleta na redução da microbiota do caldo de cana para produção de cachaça / Effect of ultraviolet radiation on microbial reduction of sugarcane juice for the production of cachaça

O processo fermentativo para produção de cachaça é influenciado pela qualidade da matéria-prima. Uma matéria-prima que contenha alta carga microbiana resultará em uma fermentação ineficiente, cujo resultado é refletido na qualidade final da cachaça. Objetivou-se nesta investigação avaliar a ação da radiação ultravioleta como desinfetante alternativo na desinfecção do caldo de cana para produção de cachaça. Confeccionou-se uma câmara de tratamento do caldo de cana com uma parte inferior e cinco tampos para instalação das lâmpadas germicidas por radiação ultravioleta. A câmara foi instalada na saída da moenda. A eficiência do tratamento foi avaliada através de análises microbiológicas do caldo de cana em cinco tempos de tratamento. O delineamento estatístico do experimento foi o inteiramente casualizado. As análises microbiológicas apresentaram um P valor de 64,63%. As análises de acidez, porcentagem de álcool e pH do vinho irradiado e não irradiado apresentaram um P valor maior que 0,05% As cachaças produzidas com caldo de cana irradiado e não irradiado apresentaram valores que estão de acordo com a legislação vigente. Concluiu-se que as características físico-químicas do caldo de cana foram influenciadas pela radiação U.V. sobre os micro-organismos presentes no mesmo, eliminando uma pequena parte destes, estatisticamente não significativas.

The fermentation process for the production of cachaça (the most popular alcoholic distilled beverage) in Brazil is influenced by the quality of the raw material. Thus any raw material containing a high microbial load results in an ineffective fermentation, which is reflected on the final quality of the cachaça. This study evaluated the action of ultraviolet radiation as an alternative disinfectant for cachaça-producing sugarcane juice. The experiment was carried out at the TUCANINHA cachaça-producing unit in the city of São João Batista do Glória, MG. A 10.0m × 43cm × 13cm aluminum plate treatment chamber was made with five 2.0 × 43cm × 14cm heads for germicidal UV lamps. The chamber was installed at the outlet of the mill for the passage of the UV-treated sugarcane juice in a continuous flow system. The effectiveness of the treatment was assayed by microbiological analyses of the cane juice at five treatment times. The statistical design was completely randomized, with five treatments and three replications, with a P value of 64.63%. Two types of fermented wines were analyzed: those from UV radiation-treated broth and the ones from untreated broth, consideration two treatments and 10 repetitions. The tests for acidity, alcohol percentage, and pH showed a P value higher than 0.05%. The cachaças produced with irradiated and non-irradiated sugarcane juice showed values in accordance with the current legislation. It was concluded that the physical and chemical characteristics of the sugarcane juice was influenced for the action of the U.V. radiation on the cane juice microorganisms. Only a small amount of microorganisms were eliminated, what demonstrates that ultraviolet radiation is not effective to eliminate the microbiota of sugarcane juice.

Pseudomonas aeruginosa: ocorrência e suscetibilidade aos agentes antimicrobianos de isolados de amostras de água tratada utilizada em solução de diálise / Pseudomonas aeruginosa: the occurrence and the antimicrobial susceptibility of bacteria isolates from treated water samples utilized for preparing dialysis solution

A pesquisa de Pseudomonas aeruginosa foi realizada em amostras de água tratada utilizada na solução de diálise de oito Unidades de Terapia Renal Substitutiva (UTRS) em quatro municípios do noroeste do estado de São Paulo e o perfil de resistência aos agentes antimicrobianos das cepas isoladas foi avaliado por teste de sensibilidade (TSA). Entre 2000 e 2009 foram analisadas 508 amostras seguindo-se a metodologia descrita no Standard Methods forthe Examination of Water and Waste water (2005) e 43 (8,5 por cento) evidenciaram contaminação por P. aeruginosa. Dessas amostras, 55,8 por cento, 23,3 por cento e 20,9 por cento foram, respectivamente, oriundas da sala branca, ponto de pós-osmose/de ionizador e sala amarela das diferentes UTRS. A frequência de isolamento da bactéria foi maior em amostrasda UTRS A (53,5 por cento) e em 2004 houve a detecção de maior número de amostras contaminadas (16,7 por cento). Dos 43 isolados, 38 foram analisados pelo TSA, sendo identificadas resistência intermediária a gentamicina em um(2,6 por cento) e resistência a aztreonam e ticarcilina/ácido clavulânico em outro isolado (2,6 por cento). Pelas implicações da P. aeruginosa em saúde pública, sua investigação no monitoramento de qualidade da água para diálise constituimedida necessária e sua ocorrência indica as possíveis deficiências no controle da rede de distribuição da água.

Contaminação bacteriana em concentrados plaquetários: identificação, perfil de sensibilidade aos antimicrobianos e sepse associada à transfusão / Bacterial contamination on platelet concentrates: identification, antimicrobial susceptibility profile and transfusion-related sepsis

INTRODUÇÃO: Devido à sepse bacteriana associada à transfusão de concentrados plaquetários (CPs) ter sérias consequências clínicas para os pacientes, alguns procedimentos têm sido incorporados na preparação e no controle de qualidade dos componentes sanguíneos para reduzir o risco da contaminação bacteriana. Este artigo descreve a prevalência da contaminação bacteriana dos CPs que foram transfundidos, o espectro bacteriano detectado com seu perfil de sensibilidade aos antimicrobianos e as reações transfusionais nos receptores. MÉTODOS: Um total de 292 CPs (278 randômicos e 14 por aférese), proveniente do Hemocentro do Estado do Rio Grande do Sul (HEMORGS) de Santa Maria foi testado. As quantidades de 100μL e 200μL foram coletadas da porção tubular da bolsa de plaquetas e semeadas utilizando dois tipos de metodologias. RESULTADOS: Em cinco unidades(1,7 por cento; 5/292) foram isoladas bactérias pela metodologia qualitativa e apenas uma pela quantitativa. Staphylococcus epidermidis foi o microrganismo identificado em todas as amostras. Dois pacientes apresentaram sepse associada à transfusão com desfecho fatal. CONCLUSÕES: A contaminação bacteriana pelas transfusões de CPs constitui-se num importante problema de saúde pública devido a sua associação com altas taxas de morbidade e mortalidade. Neste estudo, somente microrganismos gram-positivos foram isolados sendo que nenhuma amostra obtida por aférese apresentou contaminação.

INTRODUCTION: Bacterial sepsis associated with the transfusion of platelet concentrates (PCs) results in serious clinical implications for patients. Given these implications, certain procedures have been integrated into the preparation and quality control of blood components to reduce the risk of bacterial contamination. This article describes the prevalence of bacterial contamination on transfused PCs, the bacterial spectrum detected and their antimicrobial susceptibility profile and transfusion reactions in receptors. METHODS: A total of 292 PCs (278 random and 14 per apheresis) from the Blood Center of the State of Rio Grande do Sul (HEMORGS), located in the city of Santa Maria, were tested. Quantities of 100μL and 200μL were collected from platelet bag tubing and seeded using two methodologies. RESULTS: Using the qualitative methodology, bacteria were isolated in five units (1.7 percent; 5/292), while only one was isolated using the quantitative methodology. Staphylococcus epidermidis was the microorganism identified in all samples. Two patients died of transfusion-related sepsis. CONCLUSIONS: Bacterial contamination due to PC transfusion is considered a major public health problem due to its association with high rates of morbidity and mortality. In this study only gram-positive microorganisms were isolated and none of the samples obtained by apheresis presented contamination.

Análise bacteriológica comparativa entre aparelhos telefônicos públicos localizados próximos de hospitais e demais localidades da cidade de Uberaba - MG / Comparative bacteriological analysis between public telephone located close to hospitals and other locations of Uberaba city in Minas Gerais

Objetos de uso comunitário como os telefones públicos, devido a grande manipulação pela população, podem abrigar uma enorme e diversificada quantidade de microrganismos, podendo tornar-se veículos de disseminação de doenças, especialmente para pessoas com deficiência. Foram analisadas 20 amostras de telefones públicos: 10 localizados próximos de hospitais e os outros em bairros da cidade, com o objetivo de avaliar o nível de contaminação destes objetos. Em todas as amostras foram encontradas bactérias. Nos aparelhos dos bairros encontramos Bacillus gram-positivos (33,3%), Serratia sp (16,7%), Enterobacter sp, Staphylococcus coagulase-negativa e Klebisiella sp (10%), Citrobacter sp (6,7%), Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Shigella sp, e Enterococcus sp (3,3%). Nos telefones próximos aos hospitais foi encontrado Staphylococcus coagulase-negativa (22,9%), Bacillus gram-positivos (25,7%), Serratia sp (17,1%), Hafnia alvei (11,4%), Chryseobacterium odoratum e Proteus mirabilis (5,7%), Enterobacter sp (8,6%) e Citrobacter sp (2,9%). Não houve diferença significativa no nível de contaminação entre haste e fone de ouvido e entre os 2 grupos de telefones analisados. Apenas Staphylococcus coagulase-negativa apresentou diferença estatisticamente significativa.

Avaliação do processo anti-séptico em sitio de punção venosa de doadores de sangue / Anti-septic process evaluation in veins puncture besiege of blood givers

Considerando que o sangue coletado, processado e transfundido deve apresentar o menor risco possível de contaminação, necessário se faz uma anti-sepsia com eficácia comprovada, já que pesquisas apontam falhas anti-sépticas como ponto mais crítico das contaminações bacterianas de hemocomponentes. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o processo anti-séptico usado em doadores de sangue do Hemonúcleo Regional de Francisco Beltrão - PR (HRFB). Para isso foi utilizada uma metodologia que consistiu em duas coletas de microorganismos de pele de cada individuo: uma antes e outra após anti-sepsia. As amostras (165) foram divididas e avaliadas por três diferentes metodologias, colhidas com swabs estéreis embebidos em solução de cloreto de sódio a 0,9%. Os swabs foram semeados em ágar-sangue de carneiro a 5%. A incubação foi a 36º C, e a contagem foi realizada após 24 e 48 horas, respectivamente. Evidenciou-se na comparação das três metodologias que a anti-sepsia com álcool a 70%, e vigorosa fricção do algodão com técnica correta, aliada ao tempo de ação do anti-séptico sobre a pele é o ponto fundamental para a eficácia da redução de microrganismos de pele.

Considering that the collected, processed and transfused blood must present the lesser possible contamination risk, it’s necessary makes an antisepsis with proven effectiveness, since research points anti-septic imperfections as more critical point of the bacterial hemocomponents contaminations. Thus, this work had as objective to evaluate the anti-septic process used in givers of blood from the Hemonucleo Regional of Francisco Beltrao - PR (HRFB). For this, it was used a methodology that consists of two collections of skin microorganisms of each individual: one before and another one after antisepsis. The samples (165) had been divided and evaluated for three different methodologies, harvested with swabs barren absorbed in sodium chloride solution 0,9 %. The swabs had been sown in sheep agar-blood at 5 %. The incubation was at 36º C, and the counting was carried through 24 and 48 hours after, respectively. It was proven in the comparison of the three methodologies that the antisepsis with alcohol at 70%, and vigorous cotton friction with correct technique, allied to the anti-septic action time on the skin, is the basic point for the micro-organisms reduction effectivenessat skin.

Positividade de culturas microbianas durante o processamento da medula óssea e de células-tronco periféricas / Positivity of microbial culture during the processing of bone marrow and peripheral blood stem cells

Durante o processamento da medula óssea (MO) e de células tronco periféricas (CTP) é possível que ocorra a contaminação microbiana devida à grande manipulação do produto. Foram analisadas 33 coletas de MO e 230 de CTP entre março de 93 e maio de 96. Oito MO das 33 foram tratadas com o agente farmacológico mafosfamida. Antes de cada congelamento foram retiradas amostras para avaliação da esterilidade. Das 230 CTP, foram verificadas 3 contaminações (1,3%), das 25 MO não-tratadas com mafosfamida observou-se 1 (4%) e, entre as 8 MO tratadas com mafosfamida, encontrou-se 1 (12,5%) cultura positiva. Dentre as culturas positivas de CTP foram identificados os seguintes organismos: Candida parapsilosis (n=1), Staphylococus simulans (n=1) e Staphylococus auricularis (n=1). Das culturas de MO identificou-se Staphylococus auricularis (n=1) e na MO tratada verificou-se Staphylococus coagulase negativa (n=1). Medidas que assegurem a qualidade e esterilidade do produto devem ser estabelecidas.

Contaminação microbiana em carne moída de açougues da cidade de Santa Maria, RS, Brasil / Microbial contamination in minced meat of butcher shops of Santa Maria city, RS, Brazil

Foram coletadas aleatoriamente, 10 amostras de carne moída bovina em açougues da cidade de Santa Maria, RS, para determinar a presença de microorganismos totais, coliformes e Staphylococcus aureus. Respectivamente, usou-se os meios ágar para contagem total (PCA), ágar cristal violeta vermelho neutro bile e ágar bairdparker. Na contagem de microorganismos totais, 60% das amostras apresentaram entre 1,7 a 8,8 x 10(4) uFC/g de carne moída. Para Coliformes, 20% das amostras apresentaram um número menor que 1,0 x 10² uFc/g, 40% entre 1,0 a 3,2 x 10³ uFC/g, 30% entre 3,7 a 9,6 x 10(4) uFC/g e em 10% houve acidente laboratorial. Para Staphylococcus aureus, 100% das amostras resultaram positivas, sendo 50% entre 1,0 a 4,0 x 10³ uFC/g, 40% entre 1,3 a 2,8 x 10(4) e 10% entre 1,5 a 4,0 x 10(5) uFC/g de carne moída.

Ten samples of minced meat beef were collected in butcher shops of Santa Maria City, RS, Brazil, to determine the presence of total microorganism, total coliforms and Staphylococcus aureus. Respectively, PCA (Plate Counter Ágar), violet cristal red neutral bile and baird parker ágar was used. In the ágar plate counter for total microorganism. 60% of the samples presented a number between 1.7 a 8.8 x 10(4) CFU/g of minced meat. For Coliforms, 20% of the samples presented a number less than 1.0 x 10² C FU/g, 40% were among 1.0 and 3.2 x 10³ CFU/g, 30% between 3.7 to 9.6 x 10(4) CFU/g and in 10% had laboratory acidental. For Staphylococcus aureus, 100% of the samples turns positives with 50% of that between 1.0 a 4.0 x 10³ CFU/g, 40% among 1.3 to 2.8 x 10(4) CFU/g and 10% among 1.5 to 4.0 x 10(5) CFU/g of minced meat beef.

Calliphoridae (diptera) in manaus: iv. bacteria isolated from blowflies collected in street markets

Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteussp., Providenciasp., Citrobactersp. and Klebsiellasp. were isolated from calliphorid flies collected in eight street markets in the city of Manaus, Amazonas State, Brazil. The presence of £. coliin the samples suggests that faecal contamination is occurring and that these flies are potential vehicles of enteropathogenic bacteria to exposed foods.

Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteussp.. Providenciasp.. Citrobactersp. e Klebsiellasp. foram isoladas de moscas califorídeas coletadas em oito feiras livres na cidade de Manaus, estado do Amazonas, Brasil. A presença de E. colinas amostras sugere que está ocorrendo contaminação fecal e que estas moscas são veículos potenciais de bactérias enteropatogênicas para os alimentos expostos.